Fenylgalaktosid CAS:2818-58-8

Effekt på enzymaktivitet: Fenylgalaktosid brukes ofte til å måle aktiviteten til enzymet β-galaktosidase.Når fenylgalaktosid hydrolyseres av β-galaktosidase, frigjør det p-nitrofenol.Akkumuleringen av p-nitrofenol kan måles kvantitativt, og gir innsikt i aktiviteten til β-galaktosidase.Denne effekten utnyttes i applikasjoner som enzymanalyser og screeningssystemer.

Genekspresjonsanalyse: Fenylgalaktosid brukes ofte som et substrat i molekylærbiologiske eksperimenter for å studere genuttrykk.lacZ-genet, som koder for β-galaktosidase, er ofte smeltet sammen med regulatoriske sekvenser av andre gener av interesse.Ekspresjonen av lacZ-genet og hydrolysen av fenylgalaktosid av β-galaktosidase kan indikere ekspresjonsmønsteret og nivået til målgenet som studeres.

Screeningssystemer: Fenylgalaktosid er en viktig komponent i screeningssystemer som gjør bruk av β-galaktosidaseaktivitet.Et allment kjent eksempel er den blå-hvite screeningsmetoden, som brukes til å identifisere rekombinante eller transformerte celler i molekylærbiologiske eksperimenter.Kolonier som med hell har tatt opp det rekombinante DNA eller gjennomgått genetisk rekombinasjon vil uttrykke β-galaktosidase, noe som fører til hydrolyse av fenylgalaktosid og dannelse av en blå farge.

Proteinrensing: I noen tilfeller kan fenylgalaktosid brukes som en ligand for affinitetskromatografi for å rense proteiner som spesifikt binder seg til eller aktiveres av β-galaktosidase.Proteinet av interesse kan ha et affinitetsmerke eller et fusjonsmerke som inneholder et β-galaktosidasebindende domene.Ved å føre proteinblandingen gjennom en kolonne med immobilisert fenylgalaktosid, kan det ønskede proteinet selektivt beholdes og deretter elueres.