IPTG CAS:367-93-1 Produsentpris
Isopropyl β-D-1-tiogalaktopyranosid (IPTG) er en syntetisk analog av laktose som ofte brukes i molekylærbiologisk forskning og bioteknologiapplikasjoner.IPTG brukes først og fremst til å indusere ekspresjon av gener i bakteriesystemer, der det fungerer som en molekylær trigger for å starte transkripsjonen av målgener.
Når det tilsettes til vekstmediet, tas IPTG opp av bakteriene og kan binde seg til lac-repressorproteinet, og hindrer det i å blokkere aktiviteten til lac-operonet.Lac-operonet er en klynge av gener involvert i laktosemetabolismen, og når repressorproteinet fjernes, uttrykkes genene.
IPTG brukes ofte i forbindelse med lacUV5-mutantpromotoren, som er en konstitutivt aktiv versjon av lac-promotoren.Ved å kombinere IPTG-induksjon med denne mutante promoteren, kan forskere oppnå høye nivåer av genuttrykk.Dette muliggjør produksjon av store mengder protein for rensing eller andre nedstrømsapplikasjoner.
I tillegg til genuttrykk, er IPTG også ofte brukt i blå/hvite screeningsanalyser.I denne teknikken er lacZ-genet typisk fusjonert til et gen av interesse, og bakterier som vellykket uttrykker dette fusjonsgenet vil produsere et aktivt β-galaktosidaseenzym.Når IPTG tilsettes sammen med et kromogent substrat som X-gal, blir bakterier som uttrykker fusjonsgenet blå på grunn av aktiviteten til β-galaktosidase.Dette muliggjør identifisering og seleksjon av rekombinante stammer som har vellykket integrert genet av interesse.
Induksjon av genekspresjon: IPTG brukes ofte for å indusere ekspresjonen av målgener i bakteriesystemer.Det etterligner den naturlige induktoren laktose og binder seg til lac-repressorproteinet, og hindrer det i å blokkere lac-operonet.Dette muliggjør transkripsjon og ekspresjon av de ønskede genene.
Proteinekspresjon og rensing: IPTG-induksjon brukes ofte til å produsere store mengder rekombinante proteiner til forskjellige formål, for eksempel biokjemiske studier, terapeutisk produksjon eller strukturell analyse.Ved å bruke passende ekspresjonsvektorer og IPTG-induksjon, kan forskere oppnå høye nivåer av målproteinproduksjon i bakterielle verter.
Blå/hvit-screening: IPTG brukes ofte i kombinasjon med lacZ-genet og et kromogent substrat, slik som X-gal, for blå/hvitt-screeningsanalyser.lacZ-genet er typisk fusjonert til genet av interesse, og bakterier som vellykket uttrykker dette fusjonsgenet vil produsere et aktivt β-galaktosidaseenzym.Når IPTG og det kromogene substratet tilsettes, blir rekombinante stammer som uttrykker fusjonsgenet blått, noe som muliggjør enkel identifikasjon og seleksjon.
Studie av genregulering: IPTG-induksjon brukes ofte i forskning for å studere reguleringen av gener og operoner, spesielt lac-operonet.Ved å manipulere konsentrasjonene av IPTG og overvåke uttrykket av lac-operonkomponenter, kan forskere undersøke mekanismene for genregulering og rollen til ulike faktorer eller mutasjoner.
Genekspresjonssystemer: IPTG er en avgjørende komponent i flere genekspresjonssystemer, for eksempel de T7-promoterbaserte systemene.I disse systemene brukes lac-promotoren ofte til å drive ekspresjonen av T7 RNA-polymerase, som igjen transkriberer målgener under kontroll av T7-promotersekvenser.IPTG brukes til å indusere ekspresjonen av T7 RNA-polymerase, noe som fører til aktivering av målgenuttrykk.
| Komposisjon | C9H18O5S |
| Assay | 99 % |
| Utseende | hvitt pulver |
| CAS-nr. | 367-93-1 |
| Pakking | Liten og bulk |
| Holdbarhet | 2 år |
| Oppbevaring | Oppbevares på et kjølig og tørt sted |
| Sertifisering | ISO. |
