Fenylgalaktosid, også kjent som p-nitrofenyl β-D-galaktopyranosid (pNPG), er et syntetisk substrat som ofte brukes i biokjemiske og molekylærbiologiske eksperimenter.Det brukes ofte til å oppdage og måle aktiviteten til enzymet β-galaktosidase.
Når fenylgalaktosid hydrolyseres av β-galaktosidase, frigjør det p-nitrofenol, som er en gulfarget forbindelse.Frigjøringen av p-nitrofenol kan måles kvantitativt ved hjelp av et spektrofotometer, da absorbansen av p-nitrofenol kan påvises ved en bølgelengde på 405 nm.